Evaluación de la calidad seminal en semen porcino mediante dos técnicas de referencia in vitro

Authors

  • Angela Maria Delgado Maya Universidad de caldas
  • Rodrigo Andrés Botero Herrera Universidad de Caldas
  • Julián Alonso Valencia Giraldo Universidad de Caldas
  • Diana Cristina Cárdenas Marulanda Universidad de Caldas
  • Germán Gómez Londoño Universidad de Caldas
  • Francisco Javier Henao Henao Uribe Universidad de Caldas

Keywords:

Fragmentación, ADN, Penetración, Validación, Fertilidad

Abstract

En el laboratorio de Biología de la Reproducción de la Universidad de Caldas, se realizó la validación de dos técnicas de referencia in vitro para evaluación de la calidad seminal de semen porcino: el test de fragmentación del ADN espermático (TFAE) y el test de penetración in vitro con ovocitos inmaduros (TPIVOI), con el fin de obtener un análisis estandarizado y de mayor valor predictivo del potencial de fertilidad de una muestra seminal. Los protocolos adoptados para las dos técnicas, fueron evaluados mediante análisis de: Repetibilidad, Reproducibilidad, combinación de Repetibilidad y Reproducibilidad (R&R), Robustez e Incertidumbre. Los resultados mostraron que las dos técnicas son consistentes, no son afectadas por el analista, son adecuadas en relación de R&R, se establecieron condiciones de análisis en robustez y su incertidumbre es conocida; razón por la cual son conformes para su uso en el laboratorio de Biología de la Reproducción de la Universidad de Caldas. La incorporación de los dos métodos como técnicas de alta resolución, constituye un avance considerable en la evaluación de la calidad seminal en la producción porcina colombiana.

Author Biographies

Angela Maria Delgado Maya, Universidad de caldas

Estudiante de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Rodrigo Andrés Botero Herrera, Universidad de Caldas

Estudiante de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Julián Alonso Valencia Giraldo, Universidad de Caldas

Medico Veterinario Zootecnista

Estudiante de Maestría

Diana Cristina Cárdenas Marulanda, Universidad de Caldas

MsC, Ingeniera de Alimentos

Germán Gómez Londoño, Universidad de Caldas

MSc, Esp, Medico Veterinario Zootecnista

Estudiante de Doctorado

Francisco Javier Henao Henao Uribe, Universidad de Caldas

PhD Medico Veterinario Zootecnista

Director Doctorado en ciencias agrarias

References

Boe-Hansen G.B., Christensen P., Vibjerg D.,Nielsen M.B.F. y Hedeboe A.M. (2008). Sperm chromatin structure integrity in liquid stored boar semen and its relationships with field fertility. Theriogenology. 69: 728-736.

Braundmeier A.G. y Miller D.J. (2001). The search is on: finding accurate molecular markers of male fertility. J. Dairy Sci. 84: 1915-1925.

Braundmeier G., Demers J.M., Shanks R.D. y Miller D.J. (2004). The relationship of porcine sperm zona-binding ability to fertility. J. Anim. Sci. 82: 452–458.

Diaz O. Mesa H., Gómez G. y Henao F.J. (2008). Evaluación in vitro de la viabilidad del semen porcino hasta 120 horas de almacenamiento en refrigeración. Vet. Zootec. 3(1) 32-37.

Enciso M. López-Fernández C., Fernández J.P., García P., Gosálbez A. y Gosálvez J. (2006). A new method to analyze boar sperm DNA fragmentation under bright-field or fluorescence microscopy. Theriogenology. 65: 308–316.

Enciso M. (2009). La fragmentación del AND en espermatozoides de mamíferos. (Tesis doctoral) Universidad Autónoma de Madrid. España.

Eurachem. (2005). The Fitness for Purpose of Anlaytical Methods a Laboratory Guide to Meted Validation and Related Topics. Secretaria Tteddigton, Middlesex. CNM-MRD-PT-030.

Gadea, J. (1997). Predicción de la fertilidad "in vivo" de los eyaculados de verraco mediante parámetros rutinarios de contrastación seminal, pruebas bioquímicas y el test homólogo de penetración "in vitro". (Tesis doctoral). Universidad de Murcia. España

Gadea, J., Matas C., y Lucas X. (1998). Prediction of porcine semen fertility by homologous in vitro penetration hIVP/ assay. Animal Reproduction Science. 56: 95–108.

Gadea, J., y Matas C. (2000). Sperm Factors Related To In Vitro Penetration Of Porcine Oocytes. Theriogenology. 54: 1343-1357.

Henao, F.J., Díaz O. Valencia J.G., y Bedoya L.P. (2007). Evaluación de la calidad seminal en los porcinos. Porcicultura colombiana. Vol.109.

Martinez, E.A., Vazquez J. M., Matas C., Gadea J., Alonso M.I., Roca J. (1996). Oocyte penetration by fresh or stored diluted boar spermatozoa before and after in vitro capacitation treatments. Biology of reproduction. 55: 134-140

Martínez, E.A., Vazquez J.M., Roca J., Blanco O., Lucas X., Matasand C., Gil M.A. (1998). Relationship between homologous ln vitro penetration assay and boar semen fertility. Theriogenology. 371.

Pérez-Llano, B., Enciso M., García-Casado P., Sala R., y Gosálvez J. (2006). Sperm DNA fragmentation in boars is delayed or abolished by using sperm extenders. Theriogenology. 66: 2137-2143.

Pérez-Llano, B., C. López-Fernández, P. García-Casado, F. Arroyo, A. Gosalbez, R. Sala, and J. Gosálvez. (2010). Dynamics of sperm DNA fragmentation in the swine: Ejaculate and temperature effects. Animal Reproduction Science. 119: 235-243.

Schmid W. y Lazos, R.J. (2000). Guía para estimar la incertidumbre de la medición. Centro Nacional de Metrología.

Seli, E., Gardner D.K. ,Schoolcraft, Moffatt W.B., O. y Sakkas, D. (2004)Extent of nuclear DNA damage in ejaculated spermatozoa impacts on blastocyst development after in vitro fertilization. Fertility and sterility. Vol. 82 ( 2).

Xu, X., Pommier S., Arbov S, Hutchings S., Sotto W., y. Foxcroft G.R. (1998). In vitro maturation and fertilization techniques for assessment of semen quality and boar fertility. J. Anim. Sci. 76: 3079–3089.

Youden, W.J. y Steiner E.H. (1975). Statiscal Manual of AOAC. Assoc. Official Analytical Chemists, Washington. D.C

Zagal, E., Sadzawka R. (2007). Implementación del sistema para la validación de los métodos de análisis y mediciones de laboratorio en suelos y lodos. Universidad de Concepción Facultad de Agronomía Chillán.

Published

2013-07-12

How to Cite

Delgado Maya, A. M., Botero Herrera, R. A., Valencia Giraldo, J. A., Cárdenas Marulanda, D. C., Gómez Londoño, G., & Henao Uribe, F. J. H. (2013). Evaluación de la calidad seminal en semen porcino mediante dos técnicas de referencia in vitro. CITECSA, 4(6), 40–58. Retrieved from https://revistas.unipaz.edu.co/revcitecsa/article/view/46

Issue

Section

Artículos